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荧光定量PCR技术在探索脂肪肝发病机制中的应用
2024.10.24

随着现代生活节凑的加快和饮食习惯的改变,脂肪肝成为了一种越发普遍的健康问题,尤其是在快速城市化和生活水平提高的背景下。脂肪肝,尤其是非酒精性脂肪肝(NAFLD),已经成为全球范围内影响数亿人群健康的常见慢性代谢性肝病之一。该病的主要特征为肝细胞中过量脂肪积累,严重时可发展至肝纤维化。尽管NAFLD是一个重要的公共卫生议题,但其确切的发病机制仍有待进一步阐明。


肥胖的一个显著标志是脂肪组织(Adipose Tissue,AT)中出现慢性低度炎症,这会导致一系列代谢紊乱,如2型糖尿病和心血管疾病。ATs中的炎症主要表现为巨噬细胞在脂肪组织内的浸润,和由NF-kB、JNK和NLRP3炎症小体介导的炎症通路激活。此外,脂肪还能分泌多种非脂肪组织特异性表达的细胞因子,如肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)等,这些炎症因子不仅诱导脂肪组织局部炎症,还被认为是促进脂肪肝疾病发展和进展的重要因素。


在这一背景下,分子检测技术,特别是荧光定量PCR(qPCR)技术,因其高灵敏度、高特异性,已被广泛应用于信号分子及炎症因子的定量研究,成为了研究脂肪肝及相关代谢紊乱不可或缺的工具。 

据相关文献报道,利用荧光定量PCR仪可以对不同饮食干预小鼠的CD36、FABP-1、SLC27A1、SCD1、PLIN2、SREBP-1等介导脂肪肝发生的基因mRNA表达量不同进行分析。同时,结果显示番泻叶诱导的小鼠(SD)肝脏炎症因子mRNA的表达量高于对照组(WT)小鼠。



对不同饮食干预的小鼠肝脏样本进行qPCR分析,介导脂肪肝发生的信号通路基因及炎症基因的基因表达分析



ROCGENE  Archimed系列荧光定量PCR仪


鲲鹏基因旗下产品Archimed系列荧光定量PCR仪以其卓越的性能和先进的功能,在这类研究中发挥着至关重要的作用。其配套分析软件Archimed Analyzer就内置多种实验分析类型,实验人员可以根据实际的实验需求选择合适的分析方法,实现更高效的实验设计和数据分析。根据实际的实验设计和使用场景,在Archimed Analyzery运行分析软件中选择【相对定量(双标准曲线)】或【相对定量(ΔΔCq)】进行实验,可以轻松实现基因表达量的对比分析。



Archimed Analyzer 运行分析软件内置多种实验分析类型



鲲鹏基因Archimed R4 - 相对定量(ΔΔCq)法测试数据


主要优势

Archimed


 




灵敏度与特异性:能够准确检测低丰度的目标RNA/DNA,确保对关键基因如PPARγ、SREBP-1c、FAS,以及炎症因子等的表达水平进行可靠量化。


高效性与简洁化操作:简洁的软件界面和人性化的操作流程提高了实验效率,配置多种实验分析方法,使研究者能够专注于数据解释而非繁琐的操作。


高通量检测能力:Archimed系列不同机型配置2-6种检测通道,16/96/384三种通量选择,可以满足多品系小鼠目的基因的检测,实验人员可以按需选择轻松实验。


多靶标检测:Archimed系列采用创新性的时间分辨扫描模式,可以实现更高的灵敏度和更少的光路串扰,便于全面评估与脂肪肝相关的多种基因表达模式。


实时监控与数据分析:内置强大的软件支持实时监控PCR反应的进展,并提供直观的数据分析工具,帮助科研人员快速获得结果。


通过使用Archimed X系列荧光定量PCR仪,研究人员能够更有效地进行NAFLD及其他与脂肪肝相关的代谢性疾病的研究,如对介导脂肪性肝炎的炎症细胞因子,介导肝脏纤维化的纤维增生标志物如(肌动蛋白α)a-SMA、(转化生长因子β)TGF-β、(I型胶原蛋白)Collagen I,以及脂肪肝分子机制探索中的信号基因等进行定量分析等,为揭示疾病机制和寻找新的治疗策略提供有力的支持。

除此之外,在糖尿病、肥胖、肾炎等与脂肪肝相关的代谢类疾病的生物标志物检测和分子机制探索方面,qPCR技术也发挥了有效的作用。因此,在现代医学领域,qPCR技术正逐渐变革着我们对疾病的理解与治疗。



ROCGENE

鲲鹏基因致力于将生命科学研究领域的新技术转化为与临床相关的医学研究产品,开发具有自主知识产权的科研与分子诊断产品。